
ATTO 425 Biotin 是一种将高性能荧光染料 ATTO 425 与生物素(Biotin)共价偶联的荧光探针股票开户配资,主要用于生物素-亲和素/链霉亲和素系统的高灵敏度检测与成像。以下是其详细介绍:
化学性质:
结构:由 ATTO 425 染料、间隔臂(Spacer)和生物素三部分构成。ATTO 425 属于香豆素类荧光团,具有强共轭体系,生物素通过间隔臂与染料连接,确保荧光信号与高亲和素结合能力并存。
光谱参数:
激发波长:约 436 nm(激发峰 439 nm)
发射波长:约 484 nm(发射峰 489 nm)
斯托克斯位移:较大(约 48 nm),适合蓝色激光(如 442 nm 或 445 nm)激发,减少背景干扰。
荧光量子产率:高,提供强荧光信号。
光稳定性:优异,适合长时间成像及单分子检测。
基本参数:
展开剩余80%中文名:ATTO 425 生物素
英文名:ATTO 425 Biotin,AT 425 Biotin
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
包装:
相关应用:
生物素-亲和素系统的高灵敏度检测
生物素与链霉亲和素/亲和素的结合常数 Kd < 10-1-M,形成极稳定非共价复合物,用于分子捕获和信号放大。
应用技术:
免疫检测:ELISA、Western Blot、免疫组织化学(IHC)等,通过生物素-亲和素系统放大信号。
流式细胞术:作为荧光探针检测细胞表面抗原并分选细胞。
蛋白质/核酸研究:标记蛋白质或寡核苷酸,用于相互作用研究、纯化与检测。
单分子检测:高亮度、低背景和优异光稳定性使其成为单分子荧光实验的理想工具。
高分辨率细胞成像
荧光原位杂交(FISH):标记核酸探针,实现基因定位与表达分析。
细胞标记:结合高分辨率显微镜技术,观察细胞内结构动态。
活细胞成像:金属无毒特性(如 ATTO 425 DBCO 缀合物)适合活细胞标记及体内成像。
实验优化与注意事项:
荧光信号弱或无信号
原因:染料光降解、储存温度不当、激发/发射波长不匹配。
解决:全程避光操作,长期保存于 -20°C 以下,确认激发光源(405-455 nm)与检测通道(覆盖 484 nm 发射峰)。
标记效率低
原因:蛋白浓度过低(< 2 mg/ml)、pH 不在最佳范围(7.0-7.5)、二硫键未充分还原。
解决:浓缩蛋白至 ≥ 2 mg/ml(推荐 10 mg/ml),调节缓冲液 pH 至 7.0-7.5,使用 10 倍摩尔过量 TCEP 还原并去除还原剂。
过度标记
原因:蛋白表面可及半胱氨酸过多、染料用量过大或反应时间过长。
解决:降低染料投料量或提高蛋白浓度,缩短反应时间(< 2 h),加入少量 GSH 中止反应。
相关试剂(部分):
Biotin C6 T Amidite
Biotin-C5-Amine
Biotin-diSulfo-Cy3 Tyramide
APN-C3-Biotin
Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin
ATTO 488-dextran
Biotin-PEG8-NHS ester
IRDye 800CW-Maleimide
BODIPY FL-C16
iFluor 647 Styramide
Fmoc-Lys (biotin-PEG4)-OH
Biotin-PEG3-NH2
ATTO 425 Biotin
Biotin-hydrazide
Biotin-PEG12-NHS ester
Congo Red-Biotin
PE-Biotin
BB1-CONH-PEG3-Biotin
Psoralen-PEG3-Biotin
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